AtlasPlex — пятиплексная иммуногистохимия на FFPE за один день

Почему мультиплексная ИГХ сложна

Наблюдение нескольких белков на одном и том же срезе ткани позволяет увидеть, как организованы клетки и как они взаимодействуют друг с другом. Такая пространственная информация важна в онкологии, иммунологии и других областях. Однако многие существующие рабочие процессы мультиплексной ИГХ сложны в настройке и адаптации.

Многие подходы ограничены фиксированными панелями маркеров, поэтому исследователи могут отмечать только те цели, которые выбрали другие. Сбор собственной панели требует согласования видов‑хозяев первичных антител с подходящими вторичными антителами. А удаление антител между раундами нередко предполагает резкие шаги по «снятию» окраски, которые могут повредить ткань.

Как это решает AtlasPlex

AtlasPlex устраняет ряд таких шагов: его антитела предварительно биотинилированы и образуют комплекс с HRP, а детекция проводится с помощью амплификации сигнала тирамида (TSA).

• Никаких вторичных антител: это сокращает число шагов в протоколе и уменьшает объём оптимизации.
• Никаких видовых ограничений: метод работает независимо от вида‑хозяина первичных антител, что позволяет свободно комбинировать нужные маркеры.
• Никакого жёсткого удаления: между раундами активность HRP подавляется, а не физически удаляется, что помогает сохранить структуру тканей.
• Сильный, постоянный сигнал: TSA наносит стабильную флуоресцентную метку на каждую мишень.
• До пяти маркеров в день: каждый цикл занимает примерно 1,5 часа.
• Широкий каталог: панели можно составлять из более чем 17 000 подтверждённых IHC‑антител, охватывающих свыше 12 000 генов человека.
• Данные, которые можно проверить: для каждого антитела доступны сведения о тканевой экспрессии в Атласе белков человека.
• Стандартное оборудование: слайды визуализируют на обычном флуоресцентном микроскопе с широким полем зрения, специальная система визуализации не требуется.

Создание собственной панели

Исследователи выбирают цели через конфигуратор набора на веб‑сайте Atlas Antibodies; перед включением в панель можно проверить, где и как экспрессируется каждый белок согласно данным Атласа белков человека.

Приложения

AtlasPlex ориентирован на исследователей, которым нужна гибкая и воспроизводимая мультиплексная окраска тканей FFPE. Потенциальные области применения включают пространственную биологию, изучение микроокружения опухоли и поиск биомаркеров