Учёные получили 1,5 млрд клеток cDC1 из костного мозга одной мыши

Исследователи Национального института рака США при Национальных институтах здоровья разработали метод получения больших количеств иммунных клеток cDC1 из костного мозга мышей. За 23 дня культивирования удалось получить около 1,5 млрд таких клеток; более 95% культуры составляли клетки нужного типа.

Клетки cDC1 помогают иммунной системе распознавать внутриклеточные инфекции и опухоли. Они способны передавать связанные с клетками антигены CD8-положительным T-клеткам, запуская иммунный ответ. В организме cDC1 встречаются редко, поэтому получать однородные популяции для исследований сложно. Новый метод, названный iDC1, использует цитокины FLT3L, низкую дозу GM-CSF и Kit ligand. Выход клеток оказался как минимум в 75 раз выше, чем при ранее доступных методах на основе рекомбинантных цитокинов.

В работе, опубликованной в журнале Myeloid Cells, исследователи сравнили iDC1 с другими культурами клеток костного мозга. В новой системе было меньше клеток других типов, включая cDC2, плазмацитоидные дендритные клетки и макрофаги. Анализ активности генов также показал, что iDC1 ближе всего к линии cDC1 и отличается от макрофагов.

После стимуляции клетки вырабатывали сигнальные молекулы, в том числе IL-12p40 и хемокины, а в лабораторных опытах передавали клеточный антиген CD8-положительным T-клеткам. При переносе клеток мышам с дефицитом cDC1 ответ удалось восстановить у двух из четырёх животных.

Kit ligand и GM-CSF совместно влияли на ранний этап формирования клеток, а на поздних этапах GM-CSF поддерживал их размножение и выживание. Авторы также установили вклад регуляторных механизмов, связанных с усилителем +32 kb Irf8, STAT5 и BRD4. Метод создан для клеток мышей; возможность получить сопоставимый результат с человеческими клетками ещё предстоит изучить.