UCLA подготовил CRISPR-терапию серповидноклеточной болезни к испытаниям

Команда под руководством специалистов Калифорнийского университета в Лос-Анджелесе (UCLA) разработала производственный процесс для экспериментальной CRISPR-терапии серповидноклеточной болезни. Метод позволяет редактировать кроветворные стволовые клетки пациентов в объёме и с качеством, необходимыми для клинических испытаний.

В отличие от уже одобренных в США методов, новая терапия направлена на исправление самой мутации в гене бета-глобина. Извлечённые у пациента стволовые клетки обрабатывают CRISPR-Cas9 и коротким фрагментом ДНК, который служит шаблоном для коррекции. Для доставки компонентов в клетки используют электрические импульсы, временно открывающие в их оболочке поры.

Перенос процесса из лаборатории потребовал увеличить масштаб: вместо сотен тысяч клеток нужно обрабатывать сотни миллионов для одного пациента. Исследователи провели семь производственных циклов, четыре из них — в полном клиническом масштабе. Все крупные серии соответствовали установленным требованиям: полученные клетки сохраняли жизнеспособность и свойства стволовых, а мутация успешно исправлялась.

В лабораторных условиях из отредактированных клеток выращивали эритроциты. Они вырабатывали значительно меньше серповидного гемоглобина, а уровни нормального взрослого и фетального гемоглобина повышались. В опытах на мышах человеческие клетки приживались, а доля исправленных копий гена оставалась стабильной в течение 16 недель. Исследователи также не обнаружили заметной токсичности, связанной с лечением, или признаков патологических изменений тканей.

Процесс уже применили в UCLA для подготовки клеточного материала для двух участников продолжающегося клинического исследования первой фазы. Испытание под руководством Марка Уолтерса из детской больницы UCSF Benioff в Окленде оценит безопасность и эффективность метода, в том числе сохранение исправленных клеток у пациентов. Пока результаты описывают доклинические исследования и организацию производства, а не доказанную эффективность лечения у людей.

Серповидноклеточная болезнь возникает из-за мутации, из-за которой эритроциты приобретают жёсткую серповидную форму. Это может нарушать кровоток и приводить к анемии, сильной боли и поражению органов. В США заболевание встречается примерно у одного из 365 детей, родившихся у чернокожих американцев. FDA одобрило две генные терапии: одна добавляет в клетки модифицированный ген бета-глобина, другая с помощью CRISPR повышает выработку фетального гемоглобина. Новый подход пытается исправить исходную мутацию напрямую.